Informe de extracción de ARN, RT-PCR y visualización de resultados por electroforesis

Los métodos comerciales de extracción de ácidos nucleicos favorecen la purificación de estas moléculas por la química empleada en el proceso. Para el caso de ARN viral, el Kit QIAgen, permite el aislamiento de ARN a partir de muestras como plasma, suero, orina y otros fluidos corporales. El fundamento de la técnica se basa en permitir que el ARN sea absorbido por la membrana de silica gel (columna QIAamp Mini Kit) durante las fases de centrifugación, para después separarlo de esta membrana. La mayor dificultad en la extracción del ARN es evitar la contaminación con ARNasas, enzimas muy estables que no requieren cofactores para su función. Así mismo, en la electroforesis de ARN, es necesario tener algunas precauciones al momento del procesamiento de las muestras debido a que esta molécula es muy inestable. Algunos autores han encontrado que la adición de cloro comercial a las soluciones a usar durante el procedimiento de electroforesis garantiza excelentes resultados, gracias a su capacidad de destruir las enzimas encargadas de degradar el ARN (ARNasas), adicionalmente, la rentabilidad de costos se mejora, el tiempo de preparación se minimiza, el uso de productos tóxicos se reduce y la ejecución es fácil (Aranda et al., 2012).